ПЦР на вирус папилломы человека

Вирус папилломы человека присутствует у многих людей. Чтобы обнаружить его, необходимо сдать ПЦР на ВПЧ. С помощью этого исследования возможно выявить наличие вируса, количество и генотип. Этот метод считается точным и надежным, так как исследование с помощью полимеразной цепной реакции дает достоверный результат. Вирус папилломы иногда находится в неактивном состоянии, поэтому при наличии хоть одного симптома такого заболевания для подтверждения диагноза проводят исследование методом ПЦР.

Общие сведения

ПЦР метод предполагает выделение в ДНК пациента чужеродной ДНК. Дело в том, что эти клетки состоят из объединенных четырех нуклеотидов. Согласно основному правилу генетики, они располагаются в определенном порядке. ДНК инородного микроорганизма нарушает этот порядок, что позволяет выявить его даже малейшую частицу. Анализ на ПЦР проводится с присоединением возбудителя ВПЧ к ДНК обследуемого, что, приводит к стремительному делению клеток. ПЦР является достаточно распространенным анализом. Этот метод очень точен и способен определить наличие ВПЧ даже в инкубационный период. При помощи ПЦР можно выяснить:

• есть ли у человека папилломавирус;
• какой штамм инфекции;
• какое количество ВПЧ в крови.

В норме считается, что небольшое количество вируса папилломы человека присутствует, поэтому его обнаружение не количественным способом не результативно. Диагностическое значение имеет определение количества ВПЧ, а также его подтипа, который бывает как безопасным для здоровья, так и онкогенным. Чтобы обезопасить себя от возможных негативных последствий, важно вовремя сделать исследование ПЦР на вирус папилломы человека, проконсультироваться с врачом и начать необходимое лечение.

Показания

Заразиться ВПЧ возможно только от другого человека. Патогенный микроорганизм, попадая в кровь, размножается в верхних слоях кожных покровов, что приводит к характерным проявлениям — образованию папиллом или кондилом. Так как заболевание очень распространено и наблюдается практически у 80% населения, вероятность заразиться им высока. Папилломавирус передается при помощи таких путей:

• незащищенный половой акт;
• во время поцелуя;
• ребенку от мамы при родах;
• бытовым путем;
• при тесных соприкосновениях кожи.

В основном показаниями для проведения ПЦР ВПЧ являются кожные признаки заболевания, которые выглядят как бородавки на тонкой нитеобразной ножке. Даже если характерных кондилом на коже не наблюдается, вирус все равно может присутствовать в крови, но протекать бессимптомно. Если обнаруживаются папилломавирусные инфекции 16-го и 18-го подтипов, необходимо регулярно посещать гинеколога или уролога, проходить диагностическое обследование и сдавать анализ на ВПЧ. Только благодаря своевременному обращению к врачу имеется возможность не дать развиться этой коварной болезни.

Как сдавать: подготовка к обследованию

Специальной схемы подготовки к ПЦР исследованию нет. Такая диагностика предполагает взятие соскоба из уретры у мужчин. Женщины с целью определения ВПЧ сдают мазки, которые в последующем отправляют на ПЦР исследование. В связи с этим, единственной подготовкой к обследованию с помощью ПЦР является то, что перед прохождением анализа следует постараться не мочиться в течение двух часов. К особенностям такой диагностики относят то, что в течение трех дней перед ее прохождением важно воздержаться от половых контактов и принятий алкогольных напитков. Кроме основных пунктов подготовки, делая скрининг на ВПЧ, не следует забывать об интимной гигиене, впрочем, как при подготовке к любым гинекологическим манипуляциям.

Взятие биоматериала

От того, насколько качественно взят биоматериал, зависят результаты обследования ПЦР. Ведь если нарушится стерильность, в материал попадут инородные вещества или при заборе будет взято недостаточное количество анализируемых клеток, исследование будет проведено с нарушениями. Поэтому чистота, внимательность и качественное проведение анализа — это залог достоверности показателей.

Процедура у женщин

Перед тем как сделать соскоб, женщине с помощью стерильного раствора обрабатывают шейку метки. После этого, специальной щеточкой берут мазок из внутреннего канала. Делают это с помощью специального зонда или щеточки. У женщин это приспособление вводится на глубину 1-го сантиметра, после чего в течение 3-х секунд врач вращает его, совершая соскоб со стенок шейки матки. Потом аккуратно, не задевая стенок влагалища, доктор достает щеточку и помещает в заранее подготовленную пробирку. В течение 15-ти секунд она находится там, потом осторожно обтирается об стенки пробирки и извлекается. Пробирка закрывается и направляется на последующее проведение исследования.

Процедура у мужчин

Процедура у мужчин схожа. Прежде всего врач обрабатывает при помощи физиологического раствора головку полового члена вместе с отверстием мочеиспускательного канала. Щеточка вставляется на большую глубину, около 4-х сантиметров. Потом проводящий анализ вращает зонд, собирая биоматериал со стенок уретры. После неприятной процедуры щеточка помещается в пробирку и передается далее на лабораторное исследование. Готовый биоматериал имеет срок годности хранения при комнатной температуре, который составляет двое суток. Существует показатель контроля взятия материала, который обязательно указывается в бланке и подразумевает правильность и качественность проведения урогенитального соскоба.

Показатель контроля взятия биоматериала должен быть не менее 4-х единиц, если же он ниже — анализ нельзя считать достоверным и его нужно сдать еще раз.

Виды методик

Анализ ПЦР проводится с помощью разных способов определения ВПЧ. Каждый из них характеризуется своими особенностями и отличается точностью проводимого исследования. Среди таких выделяют 4 метода:

• качественный метод;
• генотипирование;
• комбинированный способ;
• количественный.

Качественный способ

Такой метод ПЦР характеризуется выявлением высокого канцерогенного риска ВПЧ. Практикуется использование его вместе с другими способами определения вируса. Главным недостатком качественного метода определения ВПЧ является то, что с его помощью нельзя установить тип возбудителя, а возможно лишь подтвердить факт заражения. Качественный метод способен показать наличие вируса от 14-го до 21-го генотипа. В бланке указывается две оценки: «обнаружено» и «не обнаружено». В первом варианте подразумевается, что в анализируемом биоматериале было найдено ДНК ВПЧ, во втором — эти же клетки отсутствуют.

Методика с генотипированием

Следующий способ ПЦР, метод с генотипированием, способен определить тип вируса. Это важно для прогнозирования и последующего лечения, так как 16 и 18 тип папилломавируса может стать причиной развития онкологических заболеваний. Если обнаруживаются такие типы, в обязательном порядке проводят кольпоскопию и цитологию урогенитальных клеток.

Генотипирование проводят тогда, когда важно отличить, произошло повторное заражение вирусом или он остался. Считают, что ВПЧ выжил после проведенного лечения, если в анализе ПЦР повторно определяется тот же генотип. Но если в исследовании обнаруживается другой тип вируса, то это говорит о повторном инфицировании ВПЧ. У семейной пары иногда определяют разные типы ВПЧ, что возможно в том случае, когда два организма по-разному освобождаются от вируса. В готовом бланке по каждому генотипу ВПЧ указывается ответ: «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Комбинированный способ состоит из качественного определения 16-го типа папилломавируса вместе с генотипированием. Ответ возможен в таких 3-х вариантах:

• не обнаружено;
• обнаружено, в том числе вирус папилломы человека 16-го типа;
• обнаружено 16 тип папилломавируса.

В первом варианте — ДНК ВПЧ указанного типа не было найдено в биоматериале. Второй вариант означает, что кроме 16-го типа присутствуют еще другие генотипы ВПЧ. И последний вариант указывает на присутствие только 16-го типа ВПЧ. Комбинированный способ ПЦР очень важен в диагностике, так как определяет наличие одного из самых опасных подтипов папилломавируса, который приводит к развитию раковых опухолей.

Количественное определение без генотипирования

С помощью такого метода определяют количество ВПЧ в анализируемом биоматериале. Полученная информация свидетельствует о тяжести инфицирования, помогает сделать прогноз и подобрать схему лечения. Определить количество возможно 16-го и 18-го генотипа ВПЧ, что немаловажно в медицинской диагностике. Такой вид ПЦР указывает на количество клеток вируса среди взятых 100 тысяч. Если в бланке пишется, что найдено более 5-ти клеток в поле зрения, то это говорит о повышенной концентрации ВПЧ и риске развития злокачественных образований. При малозначимом количестве ВПЧ указывается значение менее 3-х.

Расшифровка ПЦР

Расшифровывать результаты анализов должен врач. Но пациенту тоже важно знать о структуре бланка результатов и как правильно интерпретировать показатели. Однако помните, что найденная информация в интернете — ознакомительная. Ставить самостоятельно диагноз с его помощью не нужно. Если в анализе указано «ДНК не обнаружено», значит папилломавирус в крови отсутствует. Если показатель Lg 5 и больше, это свидетельствует о его высокой концентрации в крови, Lg 3−5 — о значимом количестве, менее 3-х — о незначительном. Подробную информацию о типе ВПЧ и схему лечения дает лечащий доктор.

ВПЧ способен вызвать рак шейки матки у женщины и другие злокачественные образования. Для мужчин этот микроорганизм тоже опасен, вплоть до развития онкологии. Папилломы, которые вырастают в мочеиспускательном канале способны привести к перекрытию просвета и вызвать импотенцию и бесплодие. Врачи заметили, что до 30-ти лет заболевания, которые вызваны ВПЧ, спонтанно регрессируют. Однако в пожилом возрасте обратное развитие происходит редко. Поэтому важно вовремя сдать анализы, правильно их расшифровать и начать лечение.

Преимущества и недостатки

ПЦР диагностика ВПЧ является одним из самых востребованных в медицине способом обнаружения папилломавируса в крови у человека. Полимеразная цепная реакция используется не только для обнаружения ВПЧ и определения его генотипа, но и при диагностике других заболеваний. Этот метод обладает множеством преимуществ перед другими при наличии всего нескольких недостатков.

ПЦР чувствителен к живым и мертвым бактериям. Это означает, что у человека, который раннее болел ВПЧ и излечился, все равно присутствует ДНК погибших микроорганизмов. Из-за такой повышенной чувствительности возможен ложный положительный результат. Чтобы анализы были качественными и достоверными, лаборатория нуждается в квалифицированном персонале и обязательной сертификации.